項目名稱：長白山林蛙高效養(yǎng)殖及利用關(guān)鍵技術(shù)體系研究與示范

項目負責(zé)人：張士俊

項目完成人：張士俊 鄒建軍 崔鐵花 勾天兵 高　波 姚旭東 胡長群 王　麗

獎勵名稱：吉林省科技進步獎

獎勵等級：三等

獎勵時間：2017年11月

項目簡介：

    長白山林蛙（又名東北林蛙Rana dybowskii ）是一種食、藥兩用的珍貴蛙種，其雌性成蛙的輸卵管具有較高的營養(yǎng)藥用價值，自古在民間就被譽為與東北三寶齊名的傳世滋補佳品。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，林蛙養(yǎng)殖業(yè)已成為東北林區(qū)新的經(jīng)濟增長點。現(xiàn)行的“半人工封溝生態(tài)養(yǎng)殖技術(shù)”雖然能初步滿足養(yǎng)蛙生產(chǎn)需要，但是一些影響林蛙養(yǎng)殖經(jīng)濟效益的關(guān)鍵技術(shù)一直沒有突破性進展，致使養(yǎng)殖業(yè)處于低效益水平徘徊。而林蛙油產(chǎn)品服用不方便、保存期短、缺少科學(xué)的質(zhì)量鑒別檢測手段也影響了下游產(chǎn)品需求，高附加值產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率低，沒有對養(yǎng)殖業(yè)起到應(yīng)有的拉動作用。為了提高林蛙養(yǎng)殖效益，開發(fā)新型產(chǎn)品，提供科學(xué)的質(zhì)量檢測方法，為林蛙產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供技術(shù)支撐，由吉林省林業(yè)科學(xué)研究院等單位承擔(dān)完成的“長白山林蛙高效養(yǎng)殖及利用關(guān)鍵技術(shù)研究與示范”（201204614）項目，經(jīng)過四年的研究取得了重要成果。

    通過在蝌蚪飼養(yǎng)期影響蝌蚪性別的關(guān)鍵時段采用相應(yīng)的降溫方法控制水溫，雌蛙比例可提高25.9%，有效提高了養(yǎng)殖經(jīng)濟效益；通過采用人工放送變態(tài)期蝌蚪和人工輔助喂養(yǎng)等措施提高了林地利用率，降低了幼蛙入林階段的損失，有助于提高林蛙產(chǎn)量；通過病害防治研究，總結(jié)出各生產(chǎn)期主要病害的防治措施，通過預(yù)防有效降低了病害隱患，避免因病害導(dǎo)致大規(guī)模死亡情況的發(fā)生；通過林蛙越冬研究，得出了林蛙瀕臨死亡的水中溶解氧臨界值，并提出了水體增氧補救措施，總結(jié)出不同越冬方式的越冬管理方法，解決了林蛙如何安全越冬的問題。

    采用真空冷凍干燥技術(shù)對凍結(jié)參數(shù)的設(shè)定進行了研究，將原料油進行預(yù)冷凍、升華干燥、解析干燥、震蕩過篩、成型等工序開發(fā)了林蛙油片和林蛙油固體膏兩個產(chǎn)品，對產(chǎn)品進行了成分分析和穩(wěn)定性實驗，其營養(yǎng)成分與原料油無明顯差別，在低溫、避光、陰涼干燥處保存穩(wěn)定性較好，常溫下保存3年，產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量、酸度和過氧化值無明顯改變。

    林蛙指紋圖譜建立與應(yīng)用采集13種蛙的樣本，使用血細胞基因組提取試劑盒提取樣本中所包含的基因組，篩選RAPD引物并進行差異條帶分析，引物S131能擴增出長度為1600bp的特異性條帶，可以作為長白山林蛙與其他樣本的基因靶點進行開發(fā)，同時引物S131能作為長白山林蛙與其他樣本的鑒別引物使用。通過特定基因測序及序列分析，不同種之間的18S rRNA序列上有差異，可以作為測序后種屬鑒定的依據(jù)。將篩選得到的差異性條帶進行序列測定，確定長白山林蛙鑒別的靶點，建立了基于PCR的林蛙鑒別方法，為林蛙質(zhì)量標準檢測提供了依據(jù)。